抗小鼠H-Y抗原IgY抗体的纯化  

Purification of Anti-Mouse H-Y Antibody,IgY

作　　者：刘本成[1] 药晨江[1] 雷庆[1] 李欣[1] 周颖[1] 徐汪节[1] 李巧丽[1] 王朝霞[1] 乔中东[1] 

机构地区：[1]上海交通大学生命科学技术学院,上海200240

出　　处：《上海交通大学学报（农业科学版）》2008年第4期272-276,299,共6页Journal of Shanghai Jiaotong University(Agricultural Science)

基　　金：上海市科技兴农重点攻关项目(沪农科攻字2003-1-3和2006-5-6)

摘　　要：用 Ni-NTA 柱纯化 SMCY 重组蛋白,将该蛋白作为配基偶联至 CNBr 活化的 Sepharose 4B制成亲和层析柱,分离纯化抗 H-Y 抗原的特异性 IgY 抗体。结果表明:Ni-NTA 柱纯化后,SMCY 重组蛋白纯度可达到80%左右;亲和层析柱纯化可以使IgY 抗体的纯度达到97%,经免疫组化检测,该抗体能够结合与雄性小鼠肝脏细胞表面,而不与雌性小鼠肝脏细胞发生结合。证实了经过纯化得到的高纯度 IgY 抗体具有很好的抗 H-Y 抗原特异性。通过该方法可纯化分离得到高纯度抗 H-Y 抗原 IgY 抗体。Purpose Get anti-H-Y antibody of high level of purity, IgY. Method： Purified SMCY recombined protein with Ni-NTA chromatography with its 6his-tag at the N-terminal, then the protein was combined to Sepharose 4B activated by CNBr in order to get the anti-H-Y antibody. Result： After purification, SMCY reeombined protein achieved to a high level more than 80% purity, and the specified IgY antibody achieves to 97%. By, immtmohistochemieal assay, our purified anti-H-Y antibody could combine to the mouse liver cells of male, but not to female. Conclusion： Our purified IgY has high antigenicity to H-Y.

关 键 词：H-Y Ni—NTA 亲和层析 IGY 

分 类 号：S864.3[农业科学—野生动物驯养]