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机构地区:[1]中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所畜牧研究室,甘肃兰州730050 [2]山东德州学院农学系畜牧研究室,山东德州253015
出 处:《家畜生态学报》2008年第3期24-27,共4页Journal of Domestic Animal Ecology
基 金:中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金(项目编号:BRF060104)
摘 要:根据GenBank中报道的猪抑制素基因序列设计两对引物,克隆含有抑制素抗原决定簇基因片段α(1~32)的p1INH和p2INH,在这两个片段中都设有限制性内切酶XbaⅠ的酶切位点,通过XbaⅠ把plINH与p2INH串联起来。串联抑制素基因片段与pcDNA3.1载体通过EcoRⅠ、HindⅢ酶切位点连接后经过转化DH5a感受态细菌构建重组载体。以重组载体作为模板,以含有EcoRⅠ、HindⅢ酶切位点的引物进行PCR,产物经验证为含串联的抑制素基因。串联的抑制素基因产生的融合蛋白具有抑制素的免疫原性,且不会与体内其他蛋白发生免疫交叉反应。串联后的基因片段在单位体积内的抗原位点数增多,免疫效果也会加强。可以反馈性地抑制FSH的分泌,提高母畜的排卵数,提高产仔数。In order to clone the tandem inhibin gene, the two different primers were designed according to the Genbank sequence, pllNH and p2INH were Tandem through Xba Ⅰ. Doubled gene encoding porcine inhibinα(l-32) was cloned and recombined with pcDNA3. 1 expression vector to construct inhibin gene vaccine pclNH. The recombinant plasmid pcINH was expressed in E. coli. DH5α. The expressed protein had inhibitted immunization activity and has no homology with other proteins in the body.
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