重组猪γ-干扰素在毕赤酵母中的表达及其生物学活性研究  

Study on the expression of PoIFN-γ in the recombinant Pichia pastoris and the biological characteristics

作　　者：黄忠[1] 黄元[1] 阮良基 曹汉威[1] 

机构地区：[1]广东省农科院兽医研究所,广东广州510650 [2]增城市畜牧管理服务中心,广东增城511300

出　　处：《广东农业科学》2008年第9期98-102,共5页Guangdong Agricultural Sciences

基　　金：广东省农业科学院院长基金项目

摘　　要：采用RT-PCR从猪外周血液淋巴细胞中克隆出猪γ-干扰素基因cDNA,构建了重组酵母表达载体(pPICZα-PoIFN-γ),并在巴斯德毕赤酵母X33株中实现了高效分泌表达,经SDS-PAGE和Western-blot证实猪γ-干扰素分子量为18 kD,细胞培养试验结果表明,重组猪γ-干扰素能抑制水泡性口炎病毒(VSV)对猪肾传代细胞(PK-15)的攻击;而在动物试验中,重组猪γ-干扰素可明显提高猪伪狂犬疫苗的免疫效果。Porcine interferon-gamma（PoIFN-γ） cDNA was cloned by RT-PCR from porcine lymphocytes in peripheral blood. The recombinant plasmid （pPICZα-PoIFN-γ） encoding PoIFN-γ gene was constructed and transferred into Pichia pastoris X33 strain. A high level expression of PoIFN-γ in the recombinant Pichia pastoris was detected by SDS-PAGE analysis and Western-blot assay. The recombinant PoIFN-γ can protect the porcine kidney cells （PK-15） from the attack of vesicular stomatitis virus in vitro and significantly enhanced the immune response of pseudorabies virus vaccine in pigs.

关 键 词：猪γ-干扰素(PoIFN-γ) 重组毕赤酵母 基因表达 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学]