人抗体Fab段天然抗体库的建立  

作　　者：韦晓明[1] 苏明权[1] 杨安钢[2] 温伟红[2] 郝晓柯[1] 

机构地区：[1]第四军医大学西京医院全军临床检验医学中心,陕西西安710032 [2]第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,陕西西安710032

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2008年第9期890-891,共2页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：国家“十五”重大科技专项课题资助(2002AA2Z3109);国家高技术研究发展计划(863)资助项目(2001AA2Z3109)

摘　　要：目的:提取健康人外周血淋巴细胞的mRNA,利用反转录PCR方法,建立一个大容量的人抗体Fab段的天然抗体库。方法:收集健康者外周血,提取淋巴细胞,以淋巴细胞mRNA为模板,扩增人抗体Fab段,连入载体pComb3内,利用电转化的方法,构建噬菌体抗体库。结果:最终建立了重链库为1.73×107,轻链库为8.52×104的天然抗体库,并利用酶切鉴定计算出实际库容为重链库1.21×107,轻链库4.26×104,所以理论上所建天然噬菌体抗体库总的库容量可以达到5.15×1011。结论:成功构建了一个大容量的完全人源化的天然抗体库。

关 键 词：天然抗体库 FAB 反转录PCR 

分 类 号：R392.11[医药卫生—免疫学]