抗呼吸道合胞病毒免疫噬菌体抗体库的构建及初步鉴定  

作　　者：汪治华[1] 张国成[1] 许东亮[1] 孙新[1] 李小青[1] 李思袖[1] 张学红[1] 聂晓晶[1] 豆玉凤[1] 

机构地区：[1]第四军医大学西京医院儿童医学中心,陕西西安710032

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2008年第9期892-893,897,共3页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30571948)

摘　　要：目的:构建小儿呼吸道合胞病毒感染患者人源性噬菌体抗体库,搭建人源性抗体制备的技术平台,为小儿呼吸道合胞病毒感染发病机制的研究、诊断、治疗和预防提供新的有效途径。方法:从52例呼吸道合胞病毒感染患儿外周血淋巴细胞中提取总RNA,并逆转录为cDNA。用PCR扩增轻链和重链Fd段(即重链的可变区和第一恒定区)基因,并将扩增的轻链和重链基因片段克隆于pComb3x噬粒载体,电转化XL1-Blue大肠杆菌,经辅助噬菌体M13K07超感染后构建成Fab段噬菌体抗体库。对此抗体库双酶切进行鉴定,并用呼吸道合胞病毒颗粒作抗原进行初步筛选。结果:经过重轻链基因的重组,成功构建一免疫噬菌体抗体基因库,共有2.6×106个不同的克隆菌,其中70%的克隆均含有轻链和重链Fd基因。因此,所构建的噬菌体抗体库的库容量为1.8×106,经初步筛选,抗体库得到了不同程度的富集。结论:利用基因重组技术和噬菌体展示技术,成功构建小儿呼吸道合胞病毒感染患者人源性免疫噬菌体抗体库,为进一步的研究奠定了基础。

关 键 词：抗体库 噬菌体展示技术 FAB抗体 呼吸道合胞病毒 儿童 

分 类 号：R392.33[医药卫生—免疫学]