一种迅捷、经济及高效回收DNA片段方法的建立  

Establishment of method of rapid,simple,efficient and economic recovery of DNA fragment

作　　者：杨春伟[1] 孙妙囡[2] 孙德军[1] 

机构地区：[1]吉林大学再生医学科学研究所生物技术药物教研室,吉林长春130021 [2]吉林大学基础医学院

出　　处：《吉林大学学报（医学版）》2008年第5期910-913,共4页Journal of Jilin University：Medicine Edition

基　　金：吉林省科技厅科研基金资助课题(20060564)

摘　　要：目的:建立一种迅捷、经济、高效的从凝胶中回收DNA的方法。方法:以二氯二甲基硅烷硅化晴纶纱,以硅化的晴纶纱作为过滤垫层,冻融处理凝胶,离心收集液体,计算不同硅化晴纶纱厚度、不同冻融时间、不同离心力、不同离心时间和不同DNA片段长度的DNA回收率。结果:用硅化晴纶纱从凝胶中回收DNA时,0.5～2.0mm硅化晴纶纱厚度DNA片段回收率均在85%左右,提示不同硅化晴纶纱厚度对DNA片段回收率影响较小;冻融时间在30min前,随着冻融时间延长,回收率上升明显,至30min回收率达85%,再增加冻融时间回收率变化不显著,提示冻融时间对回收率影响较大,冻融时间应为1h;在5000r.min-1前,随着离心力增加,回收率上升明显,至5000r.min-1回收率达85%,再增加转速,回收率有略微上升,提示离心力对回收率影响较大,离心力应超过10000r.min-1(约合10000g);以10000r.min-1离心,30min前,离心时间对回收率影响较大,至30min时,回收率达85%,增加离心时间,回收率不再增加;250～2000bp长度DNA片段,回收率为80.7%～88.4%,即使100bp小片段回收率也能达到76%以上,表明片段大小对回收率影响较小,说明本方法的有效性。结论:硅化晴纶纱厚度0.5～2.0mm,冻融时间≥1h,离心力≥10000g,离心时间30minDNA回收率较高;硅化晴纶纱法可以高效地从电泳凝胶中回收目的DNA片段。

关 键 词：DNA 回收 硅化晴纶纱 

分 类 号：Q503[生物学—生物化学]