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作 者:韩涛[1] 张勇[1] 孙书明[2] 任君琳[1] 李伟[1] 郭张燕[1] 孟艳玲[1] 杨安钢[1]
机构地区:[1]第四军医大学免疫学教研室,陕西西安710032 [2]新乡医学院免疫学教研室,河南新乡453003
出 处:《细胞与分子免疫学杂志》2008年第10期979-981,共3页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology
基 金:国家重点基础研究发展计划(973)资助项目(2004CB518805);教育部“长江学者和创新团队发展计划”资助项目(IRT0459)
摘 要:目的:观察免疫促凋亡分子ImmunoAIF△1-480对HER2阳性肿瘤细胞的杀伤作用。方法:利用PCR的方法将九聚精氨酸编码序列(R9)与AIFC-末端结构域编码区重组,然后将R9-AIF△1-480基因与pCMV-e23sFv载体重组,构建免疫促凋亡分子ImmunoAIF△1-480真核表达载体。用脂质体法转染CHO细胞,经G418筛选,建立稳定转染的细胞株,通过RT-PCR、Westernblot、流式细胞术(FCM)等方法检测重组基因在转染细胞中的表达及其对HER2阳性肿瘤细胞的特异性杀伤活性。结果:经过酶切鉴定与测序证实,带有Im-munoAIF△1-480基因的真核表达载体构建成功,经RT-PCR、Westernblot可检测到培养上清中免疫促凋亡基因的表达,用FCM检测发现融合蛋白ImmunoAIF△1-480对HER2阳性肿瘤细胞SGC-7901和SKBR-3有明显的促凋亡活性,而对不表达HER2分子的ECV-304细胞几乎没有影响。结论:Immuno-AIF△1-480可以特异性杀伤HER2阳性肿瘤细胞。
关 键 词:凋亡诱导因子 HER2阳性肿瘤细胞 细胞凋亡
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