T6-17细胞培养上清中肿瘤蛋白P185的表达  

作　　者：王弦[1] 谢小强[1] 曹亮[2] 徐振山[3] 宋礼华[3] 

机构地区：[1]安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室,安徽合肥230032 [2]安徽大学生命科学学院,安徽合肥230039 [3]安徽安科生物工程(集团)股份有限公司,安徽合肥230088

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2008年第10期1018-1019,共2页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：国家高技术研究发展计划(863)资助项目(2004AA215860)

摘　　要：目的:从转染Her-2/neu基因的T6-17细胞上清中纯化p185蛋白,研究其免疫原性和探究其在血清学诊断中应用的可能性。方法:采用溴化氰活化的Sepharose4B为基质,通过交联A18mAb,用亲和层析的技术纯化p185蛋白。将收集的T6-17细胞上清循环过亲和层析柱,经梯度盐溶液解离与抗体结合的p185蛋白,收集到蛋白洗脱峰,浓缩后用ELISA检测p185的免疫反应性,并经SDS-PAGE和Westernblot进一步鉴定。结果:ELISA检测p185保持了良好的与抗体反应活性,SDS-PAGE和Western blot进一步证实纯化蛋白的相对分子质量(Mr)约为185000,是HER-2/neu编码的肿瘤抗原。结论:从转基因细胞上清中成功获取p185肿瘤抗原,可进一步用于乳腺癌的实验室诊断研究。

关 键 词：HER-2/NEU 单克隆抗体 肿瘤蛋白 免疫亲和层析 

分 类 号：R392.11[医药卫生—免疫学]