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机构地区:[1]中国农业大学生物学院微生物与免疫学系,农业微生物资源与应用农业部重点实验室
出 处:《科学通报》2008年第19期2313-2317,共5页Chinese Science Bulletin
基 金:国家高技术研究发展计划(批准号:2003AA241150);国际科技合作项目(批准号:2006DFA31060)资助
摘 要:Na+/H+逆向转运蛋白在维持细胞质低的Na+浓度和pH稳态等生命活动过程中扮演重要角色,然而,到目前为止,对原核微生物Na+/H+逆向转运蛋白的C末端亲水域的结构和功能还知之甚少.我们曾从达坂喜盐芽孢杆菌(Halobacillus dabanensis)D-8菌株中克隆得到第一个中度嗜盐菌来源的Na+/H+逆向转运蛋白基因nhaH.疏水性分析表明,NhaH的C末端亲水域只包含9个氨基酸残基(395PLIKKLGMI403),大大短于与之高度同源的SynNhaP1和ApNhaP的C末端亲水域.本研究采用PCR方法,构建NhaH蛋白的C末端亲水域缺失突变体nhaH-C.耐盐性实验表明,C末端亲水域的缺失显著地抑制大肠杆菌缺陷株KNabc的互补能力.基于荧光强度的翻转膜活性测定结果显示,NhaH?C的Na+/H+和Li+/H+逆向转运蛋白活性显著低于NhaH,而且前者的Na+/H+逆向转运蛋白活性向酸端偏移,表明Na+/H+逆向转运蛋白NhaH短的C末端亲水域在阳离子结合、转运和pH感应上起重要作用.
关 键 词:达坂喜盐芽孢杆菌 NA^+/H^+逆向转运蛋白 C末端亲水域 盐抗性 pH感应
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