聚乙二醇修饰鼠抗人CD3单克隆抗体  

作　　者：马杭圣[1] 王鸿[1] 孙汉栋 易喻[1] 应国清[1] 

机构地区：[1]浙江工业大学药学院,浙江杭州310032 [2]杭州九源基因工程有限公司,浙江杭州310018

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2008年第11期1096-1098,1101,共4页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：浙江省重大科技攻关资助项目(2005C13025)

摘　　要：目的:确定一条聚乙二醇化鼠抗人CD3单克隆抗体(mAb)和抗体片段的制备工艺路线。方法:以胃蛋白酶酶解并通过凝胶柱分离和纯化得到抗体Fab′,利用PEG-SPA修饰抗体和抗体片段Fab′上的氨基,通过体内和体外T细胞增殖实验,考查修饰后的抗体和抗体片段的免疫活性。结果:较佳的修饰工艺条件为:在pH9.0硼酸缓冲液,反应温度25℃,抗体浓度0.2g/L,抗体和聚乙二醇摩尔比为1∶20,反应3h。修饰后抗CD3mAb全抗,对T淋巴细胞增殖抑制活性下降了32.3%,抗体Fab′下降了8.0%,PEG化Fab′下降了19.9%。利用ELISA检测血液中修饰后的抗体和抗体片段的半衰期。结果显示mPEG修饰后抗体和抗体片段血药浓度降低明显减缓,修饰后抗CD3抗体半衰期从2.66h延长到8.72h,延长了3.28倍。而修饰后抗体Fab′片段半衰期从2.21h延长到4.17h,延长了1.90倍。结论:利用聚乙二醇修饰抗体和抗体片段,提高了抗体半衰期,且无细胞毒性,活性损失较小,该技术具有较高的可行性,可极大地提高mAb尤其是非人源性抗体在临床上的应用。

关 键 词：单克隆抗体 CD3 聚乙二醇 化学修饰 免疫活性 

分 类 号：R392.11[医药卫生—免疫学]