ERCC1的表达纯化及其单克隆抗体的制备  

作　　者：李晓杰[1] 蒋华[2] 高慧萍[2] 姚晓[2] 石必枝[2] 李宗海[2] 

机构地区：[1]郴州市第一人民医院病理科,湖南郴州423000 [2]上海市肿瘤研究所癌基因及相关基因国家重点实验室,上海200032

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2008年第11期1104-1105,1109,共3页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：国家重点基础研究发展计划(973)资助(2004CB518802)

摘　　要：目的:表达纯化ERCC1蛋白并制备其单克隆抗体(mAb)。方法:克隆并原核表达ERCC1蛋白,其氨基端带有6-His标签。纯化后的蛋白免疫BALB/c小鼠,经融合、筛选制备特异性mAb。结果:成功表达了ERCC1蛋白。SDS-PAGE显示所表达蛋白的相对分子质量(Mr)约为37000。获得了1株稳定分泌抗ERCC1抗体的杂交瘤细胞株(6F8),其分泌的mAb的Ig亚类(型)为IgG2b。ELISA检测,对应腹水mAb的效价为1∶1.5×106。Western blot结果显示抗ERCC1 mAb具有良好的特异性。结论:成功地表达纯化ERCC1蛋白并制备了1株抗ERCC1 mAb。

关 键 词：ERCC1 原核表达 纯化 单克隆抗体 

分 类 号：R392.11[医药卫生—免疫学]