小鼠双尾C蛋白Bicc1多克隆抗体的制备及细胞内定位的初步研究  

作　　者：戴宝贞[1,2] 周亮[2,3] 付玉龙[2] 丁镇伟[2] 李煜[1] 吴冠青[2] 

机构地区：[1]内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室,内蒙古呼和浩特010021 [2]中国医学科学院肿瘤医院肿瘤研究所,北京100021 [3]中国科学院昆明动物研究所,云南昆明650000

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2008年第11期1106-1109,共4页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：长江学者计划支持项目(2005~2008年度);国家自然科学基金资助项目(30572205;30672483)

摘　　要：目的:制备小鼠双尾C蛋白Bicc1的多克隆抗体并确定其在细胞内定位。方法:根据生物信息学分析结果,PCR扩增小鼠Bicc1编码61E-199A的cDNA片段。将该片段克隆到GST融合蛋白表达载体上,在IPTG诱导下产生Bicc1-N抗原。纯化目的蛋白并制备兔抗Bicc1蛋白多克隆抗体。Western blot鉴定抗体特异性,并以间接免疫荧光法初步分析该蛋白在细胞内定位。结果:成功构建Bicc1-N片段原核表达载体,在大肠杆菌中实现可溶性表达,制备小鼠Bicc1蛋白的多克隆抗体,并证实该蛋白主要表达于细胞质内。结论:成功制备了高效价并特异的兔抗Bicc1多克隆抗体,为进一步研究Bicc1基因产物的生物功能奠定了基础。

关 键 词：小鼠双尾-C基因 Bicc1 多克隆抗体 多囊肾 

分 类 号：R392-33[医药卫生—免疫学] R382.5[医药卫生—基础医学]