人高迁移率族B1蛋白原核表达、纯化及抗体制备和初步应用  

作　　者：田爽[1] 刘民[1] 李欣[1] 浦永[1] 吴海东[1] 汤华[1] 

机构地区：[1]天津医科大学基础医学院生命科学中心实验室,天津300070

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2008年第11期1110-1112,共3页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：天津市科技发展计划项目(033182911)

摘　　要：目的:原核表达并纯化人高迁移率族B1蛋白(HMGB1)免疫日本大耳白兔制备其抗体。方法:构建原核表达质粒pRsetA2-HMGB1,转化大肠杆菌BL21(DE3),HMGB1蛋白经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。融合蛋白通过Ni2+-NTA树脂亲和纯化后免疫兔子制备抗体血清。以间接ELISA法检测抗体效价,Western blot和免疫荧光染色鉴定抗体特异性。结果:成功构建原核表达质粒,表达并纯化HMGB1蛋白。ELISA检测抗体效价为1∶16000以上,Western blot和免疫荧光染色确定抗体具有高度特异性。结论:HMGB1蛋白和抗体的成功制备,为下一步研究将HMGB1作为肿瘤等疾病治疗的新靶点奠定基础。

关 键 词：HMGB1 原核表达 抗体 癌症 

分 类 号：R392.11[医药卫生—免疫学]