利用双标记mTn5构建甲基杆菌MB200突变体库的研究  

Use of Dual Marker Transposon to Construct Methylobacterium sp. MB200 Mutants

作　　者：申佩弘[1,2,3] 晁红军[1,2,3] 宋修鹏[1,2,3] 武波[1,2,3] 唐咸来[1,4] 

机构地区：[1]广西大学生命科学与技术学院,广西南宁530005 [2]微生物及植物遗传工程教育部重点实验室,广西南宁530005 [3]广西亚热带生物资源保护利用重点实验室,广西南宁530005 [4]广西壮族自治区科学技术厅,广西南宁530005

出　　处：《山西农业科学》2008年第11期26-30,共5页Journal of Shanxi Agricultural Sciences

基　　金：广西青年科学基金资助项目(0832011);广西科技攻关项目(033002-5);广西大学科研基金项目(X081074)

摘　　要：Methylobacterium sp. MB200是一种粉红色的、兼性甲基营养菌,它能以单碳化合物作为唯一碳源和能源,因此,可以作为氨基酸、工业酶等的生产菌株。以M. sp. MB200一碳代谢途径作为主要研究对象,利用mTn5-gusA-pgfp21转座子构建了甲醇利用菌的突变体库,在含有丁二酸的培养基上共获得了约12000株突变体,其中,甲醇营养缺陷的突变体119株,表现GUS活性的突变体1542株。然后,根据转座子已知序列,运用TAIL-PCR的方法克隆到了突变基因的部分序列,为进一步研究一碳代谢基因以及氨基酸和工业酶等的生产打下了基础。Methylobacterium sp. MB200 is a pink and facuhatively methylotrophic bacteria, which can make a single carbon compounds as a single carbon cources energy and can be used as amino acids, epzymes industrial production strains. We mainly focus on one carbon metabolism of M. sp. MB200, using mTn5 -gusA -pgfp21 transposon mutagenesis to have construeted methylotrophic bacteria mutant pool. From the 12 000 transposon insertion mutants obtained on succinate, 119 methanol defective mutant strains were isolated, 1 542 performanced GUS activity. Then, according to the transposon known sequence, the use of TAIL-PCR method to have been cloned several mutant genes partial sequence.

关 键 词：甲基杆菌 转座子 突变体 TAIL-PCR 

分 类 号：Q93-331[生物学—微生物学]