家蝇相关序列扩增多态性扩增体系的建立与优化  

Establishment and Optimization of SRAP-PCR Amplification System for Housefly

作　　者：刘红美[1] 方小波[1] 郑勤妮[1] 胡仕明[1] 吴建伟[2] 

机构地区：[1]贵阳医学院医学生物技术教研室,贵州贵阳550004 [2]贵阳医学院寄生虫学教研室,贵州贵阳550004

出　　处：《贵阳医学院学报》2008年第6期635-639,共5页Journal of Guiyang Medical College

基　　金：贵州省优秀科技教育人才省长基金(S2004-17);贵州省高层次人才科研条件特助经费(Q2005-4);贵阳医学院博士启动基金(C2005-6)

摘　　要：目的:建立和优化家蝇的相关序列扩增多态性(SRAP-PCR)扩增体系。方法:以驯养家蝇为材料,通过单因子实验分别研究了模板DNA、Mg2+、dNTPs、引物浓度及Taq DNA聚合酶用量对家蝇SRAP分子标记扩增体系的影响,并对扩增体系进行了优化。结果:优化后的反应体系总体积为30μl,含50ng模板DNA、1.5mmol/LMg2+、0.20mmol/L dNTPs、0.15μmol/L引物和0.50U Taq DNA聚合酶。结论:家蝇SRAP-PCR扩增优化系统的建立,为今后利用SRAP技术进行家蝇遗传多样性分析、基因定位奠定了基础。Objective： To establish and optimize SRAP-PCR reaction system of housefly. Methods： Effects of concentrations of template DNA, Mg2 ^2＋ , dNTPs, primers and amount of Taq DNA polymerase on SRAP molecular marker amplification system of Musca domestica L were studied in monofactorial experiment, and the amplification system was optimized. Results： Total volume of the optimal system was 301,1 containing 50 ng of template DNA, 1.5mmol/ L of Mg^2＋ , 0. 20 mmol/ L of dNTPs, 0. 15μmol/L of primers and 0. 50 U of Taq DNA polymerase. Conclusion： This system provides a useful tool for analysis of genetic diversity and zene location of Musca domestica L.

关 键 词：蝇科 随机扩增多态DNA技术 遗传标记 

分 类 号：Q969.44[生物学—昆虫学]