蜂毒肽与变构hIL－2融合基因原核表达载体的构建  

Construction of prokaryotic expression vector of melittin fused with a hlL-2 mutant

作　　者：郑旭[1] 鲁晓睛[1] 赵巍[1] 闫志勇[1] 钱冬萌[1] 丁守怡[1] 宋旭霞[1] 徐莉莉[1] 李鹏[1] 王斌[1] 

机构地区：[1]青岛大学医学院微生物学教研室；青岛市医药生物技术重点实验室,山东青岛266071

出　　处：《世界感染杂志》2008年第6期428-430,共3页World Journal of Infection

基　　金：基金项目：山东省自然科学基金（E99C02）,山东省医药卫生科研项目（HW040）,青岛市科技计划项目（07-2-3-8-jch）,泰山学者工程资助

摘　　要：目的构建蜂毒肽与人变构白细胞介素－2原核表达载体，为进一步研究该融合基因而奠定基础。方法以本室构建质粒pGEX－4T-2／Melittin－IL－2（^88Arg）为模板，设计引物，用PCR定点突变的方法将IL-2部分的^125Cys突变为Ala，PCR产物与pMD18-T连接，转化大肠杆菌，小提质粒，DNA测序后再将目的片段连接于pET-15b，最后酶切鉴定。结果PCR产物542bp，构建质粒双酶切、DNA测序鉴定如预期。结论成功构建蜂毒肽与人变构白细胞介素-2原核表达载体。Objective To construct the prokaryotic expression vector of melittin fused with an hlL-2 mutant. Methods Using pGEX-4T-2/Melittin-IL-2 （88Arg） as the template, a mutant M-IL-2 （^88Arg, ^125Ala） was obtained by PCR point mutation. Constructing pET-15b/M-IL-2 （^88Arg, ^125Ala） by ligation pET-15b and M-IL-2 （^88Arg, ^125Ala） digested by NdeI and BamHl after the T-A cloning, which was identified by DNA sequencing. Results PCR product was 542bp long and the recombinant was identified as expected. Conclusions the prokaryotic expression vector of melittin fused with a hlL-2 mutant was obtained successfully.

关 键 词：免疫毒素 蜂毒肽 白细胞介素-2 诱变 

分 类 号：R392.11[医药卫生—免疫学]