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作 者:顾银霞[1] 周学章[1] 宋振威[1] 李敏[1] 王玉炯[1]
机构地区:[1]宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室,宁夏银川750021
出 处:《宁夏大学学报(自然科学版)》2008年第4期337-339,347,共4页Journal of Ningxia University(Natural Science Edition)
基 金:国家"973"计划基金资助项目(2006CB504401)
摘 要:为了使人源抗菌肽LL-37在原核表达载体中获得高效表达,在不改变LL-37氨基酸的基础上,根据大肠杆菌偏爱密码子表,替换LL-37部分密码子,设计一段新的LL-37序列.采用DNA Work设计4条互补引物,利用SOE-PCR技术扩增完整的LL-37目的片段,以pET-PPPI为载体,构建原核表达载体pET-PPPIL,并制备表达菌BL21(DE3)(pET-PPPIL),该菌经诱导高效表达LL-37融合蛋白,为后续纯化LL-37奠定了基础.To make highly expressed human antimicrobial peptide LL-37 in prokaryotic expression system, the part of codon of LL-37 was replaced and a new LL-37 series was designed in this work. Four complementary primers were designed by DNA Work, the integrity of the LL-37 fragment was amplified by SOE-PCR, then expression vector pET-PPPIL was constructed with pET-PPPI as the carrier, and prepared expression strain BL21 (DE3) (pET-PPPIL) which is induced expresses LL-37 fusion protein highly, this results lay a foundation for the purifing LL-37.
关 键 词:聚合酶链式反应 人源抗菌肽LL-37 蛋白表达
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