优化的复合自动诱导培养基(CAI-4)对外源蛋白在大肠杆菌中表达的影响  

Culture optimization for protein expression in Escherichia coli

作　　者：徐灵龙[1,2] 石星明[1] 王云峰[1] 孙妍[1] 王玫[1] 

机构地区：[1]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室,哈尔滨150001 [2]北京爱德士元亨生物科技有限公司,北京101300

出　　处：《微生物学报》2009年第1期128-134,共7页Acta Microbiologica Sinica

基　　金：国家“863计划”(2006AA10A206)~~

摘　　要：[目的]原核表达系统是目前最为广泛使用的一种外源蛋白表达系统。在利用原核表达系统表达目的蛋白的过程中，可溶性外源蛋白的产量是决定成本和效率的决定性因素。[方法]本项研究中利用本实验室构建的7种不同的重组质粒（p-1、p-2、p-3、p-4、p-5、p-6、p-7），检测其在复合自动诱导培养基中的表达情况，评价哪一种培养基更适合于外源蛋白的表达，提高目的蛋白的产量。[结果]结果显示，这7种重组蛋白在复合自动诱导培养基的表达量是普通LB培养基的4-8倍；并在此基础上，对复合培养基的成份进行进一步优化，形成了一种优化培养基（改良培养基-4），P-1、P-2、P-3这3种融合蛋白在这种改良培养基中的表达量比优化前提高了至少2倍。[ Objective] We developed a new culture-complex auto-inducing media （CAI） for heterogenous protein expression in Escherichia coli.[ Methods] To test expression efficiency in the CAI, we constructed seven different plasmids named p-1, p-2, p-3, p-4, p-5, p-6 and p-7. These plasmids were transformed into E. coli BL21, then expressed in both Luria-Bertani madia LB and CAl. To improve the expression level even more, we analyzed the composition of the CAI and optimized the culture. [ Results] The expression levels of seven fusion proteins in CAI were four times higher than those in Luria-Bertani. Through a series of changes we formed a new optimized culture （CAI-4） . [ Conclusion] Comparing to the expression levels of these fusion proteins （P-1, P-2, P-3） in CAI, the expression levels of fusion proteins in CAI-4 increased 2-fold.

关 键 词：蛋白表达 培养基 自动诱导 条件优化 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学]