一种快速筛选和鉴定重组体的方法——改良菌落PCR  

作　　者：毕美霞[1] 韩玲[1] 杨渝珍[1] 

机构地区：[1]同济医科大学实验医学研究中心分子生物学研究室,武汉430030

出　　处：《同济医科大学学报》1998年第1期78-79,共2页Acta Universitatis Medicinae Tongji

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.39370701)

摘　　要：在对DNA片段进行亚克隆的实验中,阳性重组子的筛选是鉴定外源DNA是否插入载体的重要步骤。常用的方法有两种:一是在含抗生素的平皿上挑取转化生长的单菌落,经液体培养基扩大培养后,提取质粒,再经酶切或PCR扩增鉴定;另外,还可以用菌落原位杂交的方法进行初筛。这两种方法虽然可靠,但是步骤复杂繁琐,而且后一种方法还存在污染问题。我们在构建重组毒素表达载体时,摸索出了一种改良的菌落PCR扩增筛选法,既准确又简易,现介绍如下。

关 键 词：PCR扩增 分子克隆 重组子 筛选 鉴定 

分 类 号：Q784[生物学—分子生物学]