药用植物白术ISSR-PCR反应体系的正交优化研究  

Study on Optimization of ISSR-PCR Reaction System of Atractylodes macrocephala Koidz by Orthogonal Design

作　　者：马辉[1,2,3] 张智俊[1] 罗淑萍[3] 何福基[1] 

机构地区：[1]浙江林学院／浙江省现代森林培育技术重点实验室,浙江临安311300 [2]阿克苏地区药品检验所,新疆阿克苏843000 [3]新疆农业大学,乌鲁木齐830052

出　　处：《新疆农业科学》2009年第1期40-45,共6页Xinjiang Agricultural Sciences

基　　金：浙江省重点实验室项目;新疆维吾尔自治区教育厅重点项目(XJEDU2004G07)

摘　　要：采用正交试验设计的方法,对白术ISSR-PCR反应体系进行优化,确立了适合于白术的ISSR-PCR反应的最佳体系,即在25μL反应体系中,10×buffer 2.5μL,Mg2+3 mmol/L,Taq酶0.75U,模板200 ng,dNTP 0.3mmol/L,引物0.5μmol/L,通过梯度PCR试验得到相应引物的最佳退火温度为55.0℃。The orthogonal design was used to optimize ISSR - PCR reaction system of Atractylodes macrocephala Koidz. A suitable ISSR - PCR system was established and a total volume of 25μL ISSR - PCR system consisted of 10 × buffer 2.5μL, Taq DNA polymerase 0.75U, Mg2 ＋ 3mmol/L, template DNA 200 ng, dNTP 0.3mmol/L, primer 0.5 μmol/L. The optimal annealing temperature of ISSR - PCR for Atractylodes macrocephala Koidz. reaction was proposed by gradient PCR.

关 键 词：白术 ISSR-PCR 体系优化 正交试验设计 梯度PCR 

分 类 号：S567.233[农业科学—中草药栽培] S332[农业科学—作物学]