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作 者:华声瑜[1] 赵桂峰[2] 郭茂娟[1] 范英昌[1]
机构地区:[1]天津中医药大学基础医学部,天津300193 [2]天津中医药大学第一附属医院心内科
出 处:《中国老年学杂志》2009年第4期409-412,共4页Chinese Journal of Gerontology
基 金:天津市社会发展科技计划项目(043111211)
摘 要:目的探讨丹参单体丹酚酸B(Salvianolic acid B,SalB)在体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为心肌样细胞的情况及Nkx2.5、GATA-4、Desmin和α-actinmRNA的表达,确定大鼠MSCs体外诱导为心肌样细胞的条件、规律及转化细胞的特点。方法选用成年近交系Wistar大鼠,利用percoll分离液进行密度梯度离心法和直接贴壁法进行分离、提纯MSCs,并进行培养扩增。免疫组化方法对第9代MSCs表面抗原进行鉴定。分别应用10μmol/L5-氮胞苷(5-aza)及250mg/LSalB联合5-aza(5-aza+SalB)对第9代的MSCs进行联合诱导24h,于诱导后第4周,用实时荧光定量RT-PCR法检测Nkx2.5、GATA-4、Desmin和α-actin的基因表达。结果①第9代MSCs免疫组化染色CD44呈阳性表达,CD34呈阴性表达。②诱导4w后,细胞体积变小,可见由几个细胞连接形成的多核肌管样结构。5-aza组、5-aza+SalB组均出现明确的心肌早期分化基因;与5-aza组相比,5-aza+SalB组的Nkx2.5、GATA-4、Desmin和α-actin mRNA的表达明显增强。结论SalB具有促进5-aza诱导的MSCs向心肌样细胞分化的作用,并且在Nkx2.5基因表达上SalB的优势更加明显。
关 键 词:丹酚酸B 骨髓间充质干细胞 5-氮胞苷 心肌样细胞 基因
分 类 号:R329.2[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学] R336[医药卫生—基础医学]
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