矢车菊甙-辣根过氧化物酶-过氧化氢新体系及其在酶联免疫传感分析中的应用  

作　　者：龚福春[1] 李定中[1] 杨荣[1] 魏建科[1] 曹忠[1] 谭淑珍[1] 谭亚非[1] 

机构地区：[1]长沙理工大学化学与生物工程学院,长沙410004

出　　处：《中国科学（B辑）》2009年第2期153-158,共6页Science in China(Series B)

基　　金：湖南省科技计划项目(批准号:2008SK3052);湖南省教育厅科研项目(批准号:08B004;07A006)资助

摘　　要：以一种天然色素矢车菊素-3-葡萄糖苷(Cyanidin-3-glucose,CAG)为辣根过氧化物酶(HRP)底物建立了矢车菊甙-辣根过氧化物酶-过氧化氢新体系.CAG在540nm处有一个吸收峰(AP1),在HRP催化下被H2O2氧化,AP1降低;同时,其氧化产物在482nm处产生一个新吸收峰(AP2),并且反应体系中两峰值的比值R(AP2/AP1)与HRP量在一定浓度范围内呈线性相关.根据此原理,以猪口蹄疫病毒蛋白(food and mouth disease virus antigen,FMDVAg)为分析模型,建立了检测猪口蹄疫病毒的酶联免疫传感分析新方法.该方法利用伴刀豆蛋白(Conconvalina,ConA)对糖蛋白的识别特性固定HRP-猪口蹄疫病毒抗体连接物(HRP-FMDVAb),由ConA介导和磁性分离实现了免疫反应特异性组分和非特异成分,以及反应免疫磁性珠与没反应免疫磁性珠的分离.运用制备的传感体系测定猪口蹄疫病毒的线性范围为1.5×10-8～2.7×10-6g/mL,抗原检出限为3.1×10-9g/mL,相对标准偏差为3.7%(n=11).底物CAG及其产物的水溶性好,对人体无毒副作用,在临床上可代替传统HRP底物进行免疫检测.

关 键 词：矢车菊甙 HRP底物 酶联免疫传感 猪口蹄疫病毒 

分 类 号：R446.6[医药卫生—诊断学]