香石竹GA20-oxidase基因的克隆及RNA干扰载体的构建  

Cloning of Carnation GA20-oxidase Gene and Construction of Plant RNAi Vector

作　　者：金亮[1] 孙振元[2] 刘芸[1] 李天红[1] 

机构地区：[1]中国农业大学农学与生物技术学院果树系/北京市果树逆境生理与分子生物学重点开放实验室,100193 [2]中国林业科学院花卉中心,北京100093

出　　处：《农业生物技术学报》2009年第1期107-113,共7页Journal of Agricultural Biotechnology

基　　金：新世纪人才支持计划(No.NCET-06-0108);国家“十一五”支撑计划(No.2007BAD36B02);北京市教育委员会都市农业学科群建设项目(No.XK100190553)资助

摘　　要：根据已发表的菠菜、烟草等植物GA20-oxidase基因序列在保守区设计简并引物，通过RT-PCR和RACE的方法克隆了Marster香石竹（Dianthus caryophyllus L．CV．Marster）GA 20-oxidase基因的全长cDNA（1179bp），命名为Dc200x。同源性分析表明该基因与其它作物上发表的GA 20-oxidase基因的氨基酸序列同源性为66％-75％。在此基础上选用香石竹GA 20-oxidase基因同源性相对较高的400bp DNA片段，构建了RNA干扰（RNAi）载体pART400。A pair of degenerate primers were designed based on the conserved domain of the GA 20-oxidase reported in other plants. A full-length cDNA （1179bp） of carnation （Dianthus caryophyllus L. cv. Marster） GA20-oxidase named Dc2Oox was cloned by RT-PCR and RACE methods. The deduced amino acids of this sequence shared a high homology. Blast showed that the amino acids sequence presented a high homology （66%-75%） with the GA20-oxidase in other plants. A RNAi vector （pART400） was constructed using a 400 bp fragment which had high homology with GA20-oxidase gene.

关 键 词：香石竹 GA20-oxidase基因 RNAI 

分 类 号：S188[农业科学—农业基础科学]