病木样本松材线虫DNA检测方法研究  

作　　者：夏彦飞[1] 李红梅[1] 王暄[1] 付鹏[1] 林茂松[1] 

机构地区：[1]南京农业大学植物保护学院,江苏南京210095

出　　处：《江苏农业科学》2009年第1期35-37,38,共4页Jiangsu Agricultural Sciences

基　　金：国家"863"项目(编号:2001AA249021)

摘　　要：松材线虫是我国禁止进境的检疫性有害生物,在形态学特征上和拟松材线虫很相似。为提高口岸木材检疫中松材线虫鉴定速度和准确性,我们开展了从含线虫木样中直接检测松材线虫的初步研究。根据松材线虫和松树内其他寄生线虫核糖体DNA的ITS区序列差异,设计了松材线虫的特异性引物对BXF/BXR,并对7个松材线虫分离物、4个拟松材线虫分离物和1个待鉴定伞滑刃线虫分离物的基因组DNA进行PCR扩增,结果从所有松材线虫分离物中都扩增到长度约为580 bp的特异性条带,而其他分离物没有扩增产物出现。采用CTAB法提取含虫病木样本总基因组DNA,用引物对BXF/BXR对不同稀释梯度的DNA样品进行扩增,当含虫木样总DNA被稀释到8倍以上时,可从DNA模板中扩增出特异性条带。特异性引物对BXF/BXR检测木样中松材线虫的灵敏度可达10条线虫/100 mg木样。

关 键 词：病木样本 松材线虫 DNA检测 

分 类 号：S763.7[农业科学—森林保护学]