林肯链霉菌谷氨酸合酶的纯化和性质  

作　　者：金詟[1] 焦瑞身[1] 

机构地区：[1]中国科学院上海植物生理研究所,上海200032

出　　处：《中国科学（C辑）》1998年第1期7-14,共8页Science in China(Series C)

基　　金：国家"八六三"计划基金资助项目

摘　　要：采用硫酸铵分级沉淀、离子交换层析、凝胶过滤和吸附层析等方法 ,分离纯化了林肯链霉菌谷氨酸合酶 ,电泳鉴定为单一组分 .这是链霉菌中的第 1例 .谷氨酸合酶很不稳定 ,向酶缓冲液中加入α KG ,PMSF ,EDTA ,β 巯基乙醇和甘油可以大大提高其稳定性 .测得全酶分子量为 1 38ku ,亚基分子量为 81和 5 7ku ,表明该酶由2个不相同的亚基构成 .吸收光谱在 380和 440nm附近没有吸收峰 ,表明该酶是不含铁的非黄素蛋白质 .该酶反应的最适 pH为 7 2 ,最适温度为 30℃ .该酶对NADH ,α KG和L Gln的表观Km 值分别为 5 2 1× 1 0 -5 ,4 1 7× 1 0 -4 和 4 35× 1 0 -4mol/L .以NADPH代替NADH作电子供体 ,该酶仍表现出部分活力 .反应产物Glu和NAD+,部分金属离子、氨基酸及三羧酸循环中间物对该酶活力有不同程度的抑制作用 .

关 键 词：林肯链霉菌 谷氨酸合酶 提纯 氨同化 氮代谢 

分 类 号：Q939.132[生物学—微生物学]