犬骨骼肌成肌细胞体外分离、纯化及培养方法改良探索  

作　　者：苏冠华[1] 刘启云[1] 卢永昕[1] 米少华[1] 孙雨霏[1] 刘晓明[1] 帅欣欣[1] 

机构地区：[1]华中科技大学同济医学院附属协和医院心内科心血管病研究所,湖北武汉430022

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2009年第3期257-259,共3页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30470457)

摘　　要：目的:探讨犬骨骼肌成肌细胞(SkMs)体外分离、纯化及培养方法的改良并研究其生物学特性。方法:采用机械分离结合Ⅱ型胶原酶、中性蛋白酶双酶一步消化法分离犬骨骼肌成肌细胞,经差速贴壁法纯化后,在骨骼肌细胞生长培养基(SKGM)中进行原代和传代培养,免疫细胞化学染色鉴定。结果:改良后的培养方法适于获取犬骨骼肌成肌细胞,SKGM培养基适于犬骨骼肌成肌细胞的体外培养。SkMs在细胞密集或低血清分化培养基作用下可融合成肌管。结蛋白(desmin)单克隆抗体(mAb)细胞化学染色鉴定SkMs呈阳性,纯度在90%以上。结论:通过改良后的双酶一步消化法获得的SkMs在合适的培养条件下能够增殖、分化并保持其生物学特性,为其在基因治疗和组织工程中的应用奠定了基础。

关 键 词：犬 骨骼肌成肌细胞 细胞培养 生物学特性 

分 类 号：R392.12[医药卫生—免疫学]