人细小病毒B19-XA株VP1蛋白在Bac-to-Bac系统中的表达及其反应原性分析  

作　　者：李小青[1] 张国成[1] 许东亮[1] 聂晓晶[1] 

机构地区：[1]第四军医大学西京医院儿科,陕西西安710032

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2009年第3期265-268,共4页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30571948)

摘　　要：目的:探讨人细小病毒B19-XA株VP1蛋白在Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中的表达及其反应原性分析。方法:以PCR法扩增VP1全长基因,并将其克隆到pFastBac1载体中,通过转化E.coliDH10Bac筛选阳性克隆,抽提重组VP1-Bacmid。以VP1-Bacmid经Cellfectin介导转染昆虫细胞Sf9,获取重组杆状病毒,扩增后感染Sf9细胞表达VP1蛋白,并以SDS-PAGE进行鉴定。以表达的重组VP1蛋白作为抗原,采用间接ELISA法检测B19病毒感染的患儿血清抗体,并与德国ELISA试剂盒检测的结果比较,分析表达产物的反应原性。结果:(1)获得含VP1全长基因的重组杆状病毒,转染Sf9细胞后能表达相对分子质量(Mr)约87000的VP1重组蛋白。(2)以表达的重组VP1蛋白作抗原,与B19病毒感染的患儿血清的反应,平均A值为0.46,P/N值>2.1,与德国ELISA试剂盒检测的结果(平均A值为0.68)相似。结论:人细小病毒B19-XA株VP1蛋白在Bac-to-Bac表达系统中可成功表达,且表达产物能有效地与抗B19病毒的阳性血清反应,具有良好的反应原性。

关 键 词：人细小病毒B19 VP1基因 杆状病毒 蛋白表达 转染 反应原性 

分 类 号：R373[医药卫生—病原生物学]