反义PARP基因真核表达重组体的构建及其HeLa转化细胞系的建立  

CONSTRUCTION OF ANTISENSE PARP cDNA RECOMBINANTS AND ESTABLISHMENT OF THE HeLa TRANSFORMANT AFTER ANTISENSE PLASMID INTRODUCING

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作  者:杨其伟[1] 史国利[1] 陈雅文[1] 刘丛[1] 陈德风[1] 

机构地区:[1]南开大学分子生物学研究所,天津300071

出  处:《南开大学学报(自然科学版)》1998年第1期59-63,112,共6页Acta Scientiarum Naturalium Universitatis Nankaiensis

基  金:国家自然科学基金!39480016

摘  要:利用DNA体外重组技术将PARP基因cDNA部分序列反向克隆到真核表达载体pMAMneo上,构建成重组质粒pMAMneo-C1.4和pMAMneo-C0.3.将重组质粒pMAM-neo-C1.4转染HeLa细胞,经G418筛选,建成细胞系HeLa-C1.4-neo,Southern杂交结果表明,外源PARP基因cDNA部分序列已稳定整合到受体细胞基因组中,该细胞系的建立为研究聚ADP核糖基化作用在细胞内的功能打下了基础.The recombinants pMAMneo-C1. 4 and pMAMneo-C0. 3 were constructed by inserting varied partial length cDNAs of poly (ADP-ribose) polymerase gene into mammalian expressive vector pMAMneo respectively. The transformed cell line, HeLa-C1. 4-neo, capable of generating antisense RNA for poly (ADP-ribose) polymerase gene was obtained by introducing pMAMneo-C1. 4 plasmid into HeLa cells. Southern blot analysis showed that the exogenous partial cDNA for poly (ADP-ribose) polymerase had been integrated into the cell chromosomes. The established cell line laid a foundation for evaluating the biological roles of poly (ADP-ribosyl) action in eukaryotic cells.

关 键 词:PARP基因 DNA转染 Hela转化细胞系 真核表达 

分 类 号:Q78[生物学—分子生物学]

 

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