Aβ_(25-35)诱导大鼠胚胎海马神经元凋亡的形态学影响  

Effects of Genistein on morphological changes in cultured hippocampal neurons following β-Amyloid_((25-35))-induced apoptosis

作　　者：王超[1] 王四旺[1] 涂宏海[2] 肖茜[3] 杨浩[4] 张松[1] 

机构地区：[1]第四军医大学药学系药物研究所 [2]新疆军区联勤部药品仪器检验所,新疆乌鲁木齐830063 [3]第四军医大学西京医院中医科 [4]第四军医大学基础部神经生物学教研室,陕西西安710033

出　　处：《第四军医大学学报》2009年第6期505-508,共4页Journal of the Fourth Military Medical University

基　　金：陕西省社会发展攻关计划项目[2005K14-G3(3)]

摘　　要：目的：观察染料木素（Genistein，Gen）对Aβ-amyloid peptide fragment25-35（AB25-35）诱导胎鼠海马神经元细胞损伤前后形态学指标的变化．方法：取16—18d孕龄胎鼠海马组织进行神经元细胞的原代培养，细胞培养72h后进行实验．Gen浓度为0．32mg／L，用0．01μmol／L 17β-雌二醇为阳性对照组，细胞损伤模型采用25mg／L Aβ25-35建立．实验分6组，即Gen组、Gen模型组、雌二醇组、雌二醇模型组、空白组和空白模型组．海马神经元培养完毕，将Gen、17β-雌二醇比Aβ25-35提前4h加入培养液，继续孵育24h后观察海马神经元细胞形态学：活细胞形态、细胞核Hoechst33342和PI双染色以及神经元NSE和Tunel双染色等指标的变化水平．结果：①空白模型组海马神经元细胞树突轴突基本消失，未见网状结构，细胞胞体没有折光性，细胞碎片很多；和空白模型组相比较，Gen模型组细胞可见明显树突轴突，并可连接成网状结构，细胞胞体部分可见折光性，细胞碎片明显减少．Gen模型组和雌二醇模型组细胞形态差异不大．②空白模型组可见大量坏死细胞核（红色），仅有少量正常细胞；和空白模型组相比较，Gen模型组坏死细胞核的数量明显减少，而正常细胞核的数量明显增加．Gen模型组和雌二醇模型组差异不大．③空白模型组可见大量坏死细胞核着色（Tunel黄绿色），而胞体染色（NSE红色）不可见；和空白模型组相比较，Gen模型组坏死细胞核的数量明显减少，而正常细胞的数量明显增加，且胞体可连接呈网状结构．Gen模型组和雌二醇模型组细胞形态差异不大．结论：①Gen模型组较空白模型组能明显改善Aβ25-35诱导损伤后海马神经元细胞形态学各指标，且和雌二醇模型组比较差异不大；②Gen对Aβ25-35诱导的海马神经元起保护因子或抗凋亡因子的作用，Gen有一定的神经保护作用；③Gen�AIM： To investigate the neuroprotective effect of Genistein on morphological changes in cultured hippocampal neurons following β-Amyloid（25-35）-induced apoptosis. METHODS： The model of damage was induced by Aβ25 -35 and the changes of cell morphology were observed. Apoptosis in hippocampal neurons induced by Aβ25-35 was detected with hoechst33342 and PI co-staining method. NSE and Tunel double-staining assay were also conducted. RESULTS： Compared with that in Aβ25- 35 only group, the morphology damage of hippocampal neurons in Genistein model group was less severe and apoptosis in Genistein model group was obviously lower. CONCLUSION： Genistein, with some neuro- protective or anti-apoptotic effects, plays an important role in upregulating the hippocampal neuronal survival during the process of Aβ25 -35-induced damage.

关 键 词：染料木素 AΒ25-35 海马 神经元 细胞凋亡 形态学 

分 类 号：R322.81[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]