苦参碱联合DMSO大规模冻存人胎肝细胞的实验研究  

作　　者：龚独辉[1] 潘明新[1] 姚坤厚[1] 夏武政[1] 康玉占[1] 汪艳[1] 高毅[1] 

机构地区：[1]南方医科大学珠江医院肝胆外科,广州510282

出　　处：《广东医学》2009年第4期512-514,共3页Guangdong Medical Journal

基　　金：国家高技术研究发展(863)计划项目(编号:2006AA02A141);广州市科技计划项目(编号:2006Z3-E0131)

摘　　要：目的观察苦参碱对大规模低温冻存人胎肝细胞功能的影响。方法改良肝细胞获取方法分离人胎肝细胞,经过1h预培养后。将5种不同浓度(1×107,2.5×107,5×107,7.5×107,10×107.mL-1)的胎肝细胞以6mg/L苦参碱+5%DMSO为冻存保护液置于骨髓干细胞冻存袋在液氮中冷冻保存1个月。1个月后复苏,进行活率、形态学及功能检测。结果5种不同浓度的细胞冻存1个月后,细胞浓度为2.5×107·mL-1组复苏后存活率与其余四组相比差异有显著性(P<0.05),且明显高于其余四组。复苏后细胞存活率和24h贴壁率分别为73%,69%,经过短期培养后,细胞功能逐渐恢复。结论(1)苦参碱对低温冻存的人胎肝细胞有保护作用,与二甲基亚砜联用可降低DMSO的浓度;(2)以5%DMSO+6mg/L苦参碱作为冻存保护剂,细胞浓度在2.5×107·mL-1冻存效果最佳。该大规模冻存方法基本上可以满足生物人工肝肝细胞应用的需求。

关 键 词：生物人工肝 人胎肝细胞 冷冻保存 苦参碱 

分 类 号：R512.63[医药卫生—内科学] R318.52[医药卫生—临床医学]