Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1基因克隆及其原核表达  

作　　者：孔留五[1] 康艳梅[1] 何逸民[1] 李小康[1] 潘全会[1] 张桂红[1] 

机构地区：[1]华南农业大学兽医学院,广东广州510642

出　　处：《上海畜牧兽医通讯》2009年第2期8-10,共3页Shanghai Journal of Animal Husbandry and Veterinary Medicine

基　　金：广东省自然科学基金(5006678)

摘　　要：根据Genbank中的Ⅰ型鸭肝炎病毒全基因序列设计了扩增Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1基因的包含有EcoRV和XhoⅠ酶切位点的引物,用该特异性引物从Ⅰ型鸭肝炎病毒cDNA模板中扩增得到目的基因VP1,以相同的限制性内切酶酶切目的基因和表达载体pET32a后构建重组表达载体,经酶切及PCR鉴定筛选出阳性克隆,测序证明目的基因正确插入了表达载体,转化宿主菌RossetaⅡ,用不同浓度的IPTG诱导VP1基因的表达,收集菌液进行SDS-PAGE电泳,Western-blotting分析蛋白免疫原性。结果表明,VP1在大肠杆菌RossetaⅡ中表达量较高,表达产物的分子量约为48 ku、并能被Ⅰ型鸭肝炎病毒阳性血清所识别。Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1蛋白在大肠杆菌RossetaⅡ中表达产物具有免疫原性。

关 键 词：Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒 VP1基因 诱导表达 

分 类 号：S852.65[农业科学—基础兽医学]