人IL-18cDNA克隆及其真核表达质粒的构建  

Human interleukin-18: molecular cloning and eukaryotic expression vector construction

作　　者：张国荣[1] 赵建增 陈涛[1] 王晓平[1] 

机构地区：[1]空军总医院临床分子生物学研究中心基因治疗研究室,北京100036

出　　处：《生物技术通讯》1999年第4期254-257,共4页Letters in Biotechnology

基　　金：全军"九五"医药卫生基金资助

摘　　要：用ＲＴ－ＰＣＲ技术从健康人外周血单核细胞的总ＲＮＡ中扩增出编码白细胞介素１８的全长ｃＤＮＡ，并将此基因定向克隆入真核表达质粒载体ｐｃＤＮＡ３中，通过对转化子的筛选得到了带有ＩＬ－１８插入片段的阳性克隆，经酶切分析及核苷酸测序表明，克隆到的基因与文献报道的完全一致。把重组质粒ｐｃＤＮＡ３／ＩＬ－１８分别转染人肝癌细胞ＨｅｐＧ２和鼠肉瘤细胞Ｓ１８０，在ｍＲＮＡ水平检测到ＩＬ－１８的表达，但ＩＬ－１８ 的表达未诱导肿瘤细胞产生ＩＦＮ－γ。The cDNA that encoding the human interleukin-18 was cloned using a RT-PCR from human blood monocytes, and an eukaryotic expression plasmid pcDNA3/hIL-18 was constructed. Restricted enzyme and sequence analysis had proved the correctness of the cDNA and the expres- sion vector. IL-18 expresses in human hepatoma cell line HepG2 and murine sarcoma cell line S180 transfectants, which did not stimulate IFN-γ production in these cells,as measured with RT- PCR.

关 键 词：白细胞介素18 基因克隆 RT-PCR 序列分析 

分 类 号：Q785[生物学—分子生物学] Q782