PCR技术诊断隐孢子虫病方法的建立及其初步应用  

作　　者：李建华[1] 张西臣[1] 尹继刚[1] 杨举[1] 李德昌[1] 

机构地区：[1]解放军农牧大学寄生虫病教研室,长春130062

出　　处：《中国农业大学学报》1998年第S2期170-170,共1页Journal of China Agricultural University

摘　　要：本研究应用聚合酶链反应（PCR）建立了一种检测人及牛粪便中隐孢子虫卵囊 DNA 的方法.以蔗糖梯度离心法纯化鼠源 C.muris 卵囊;甘油漂浮-G₃耐酸漏斗过滤法纯化牛源 C.muris、牛源 C.parvum 和鼠源C.parvum 卵囊.结果发现甘油漂浮-G₃耐酸漏斗过滤法纯化隐孢子虫卵囊具有纯度高、回收率达96%、介质便宜及操作简便等优点.纯化卵囊经液氮冻融后按常规法提取 DNA 作为 PCR 模板.根据 GenBank 中C.muris 和 C.parvum 18SrRNA 基因序列,应用计算机辅助设计合成一对 PCR 引物（上游引物:5′-AAACCCAACTTTGCGGAAGG-3′,下游引物:5′-CCATGCTGGAGTATTCAAGGC-3′）.

关 键 词：初步应用 研究应用 梯度离心法 隐孢子虫卵囊 纯化 过滤法 设计合成 计算机辅助 常规法 液氮冻融 

分 类 号：S855.9[农业科学—临床兽医学]