检测马白细胞介素-18双抗体夹心ELISA方法的建立  

作　　者：童铁钢[1] 白宇[1] 张维军[1] 王群[1] 刘光亮[1] 徐树兰[1] 吴东来[1] 

机构地区：[1]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔滨150001

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2009年第4期364-365,368,共3页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：国家高技术研究发展计划(863)资助项目(2006AA10A203);黑龙江省自然科学基金重点资助项目(ZJN-0602-01)

摘　　要：目的:建立检测马白细胞介素-18(equine interleu-kin-18,EIL-18)的双抗体夹心ELISA,为马传染病的免疫学研究提供新方法。方法:将识别不同表位的EIL-18的2株单克隆抗体(mAb)B1G1和S6A3纯化后,利用生物素标记试剂盒对B1G1株mAb进行标记,以重组马白细胞介素-18(rEIL-18)为捕获抗原进行ELISA检测来建立EIL-18双抗体夹心ELISA。结果:经过方阵滴定试验确定捕获抗体的最佳浓度为4mg/L,检测抗体的工作效价为1∶2000。建立的方法可检测马血清中的EIL-18,与猪、牛和羊血清中的IL-18不发生交叉性反应,此方法检测敏感度达到15ng/L,特异性良好。结论:成功建立了EIL-18的双抗体夹心ELISA,为马细胞免疫学研究提供了方法,也为下一步EIL-18ELISA试剂盒的商品化开发奠定了坚实基础。

关 键 词：马白细胞介素-18 单克隆抗体 夹心ELISA 

分 类 号：R392.11[医药卫生—免疫学]