个旧矿粉诱导的支气管上皮转化细胞cDNA消减文库的构建  

作　　者：梁锐[1] 金克炜[2] 王志强[3] 高倩[2] 阮永华[2] 王芳[2] 

机构地区：[1]昆明医学院附属昆华医院(云南省第一人民医院)病理科,650032 [2]昆明医学院附属昆华医院(云南省第一人民医院)病理学教研室,650032 [3]昆明医学院附属昆华医院(云南省第一人民医院)第一附属医院肿瘤治疗中心,650032

出　　处：《中华劳动卫生职业病杂志》2009年第4期242-244,共3页Chinese Journal of Industrial Hygiene and Occupational Diseases

基　　金：国家自然科学基金项目（30560053）;高等学校博士学科点专项科研基金（20050678004）.天津市泌尿外科研究所肿瘤免疫室畅继武、马富明等老师提供实验场所和技术指导,志谢

摘　　要：目的构建永生化人支气管上皮细胞BEAS-2B与其受个旧矿粉体外诱导的恶性转化细胞之间差异表达的cDNA消减文库。方法以BEAS-2B为对照组，以采自个旧井下作业面的矿粉为染毒物在体外成功诱导的恶性转化细胞为实验组，分别提取总RNA；应用SMARTcDNA合成技术，获得充足的dscDNA；应用抑制性消减杂交（SSH）技术分离BEAS-2B与其恶性转化细胞之间差异表达的基因片段；再通过T／A克隆和蓝白筛选实验，克隆BEAS-2B与其恶性转化细胞之间差异表达的基因片段，构建二者之间差异表达的cDNA消减文库。结果通过SSH和T／A克隆等技术成功构建了具有较高消减效率的BEAS-2B与其恶性转化细胞之间差异表达的cDNA消减文库，文库经扩增后得到107个白色克隆和41个蓝色克隆。结论应用SSH技术成功构建了具有较高消减效率的BEAS-2B与其恶性转化细胞之间差异表达的cDNA消减文库，为进一步研究个旧矿粉致肺癌发生的分子生物学机制奠定了基础。

关 键 词：个旧 矿粉 抑制性消减杂交 差异表达 支气管 上皮细胞 恶性转化 

分 类 号：R686[医药卫生—骨科学]