鲫鱼PKZ Zα结构域与d(GC)、d(TA)重组质粒的结合  

Affinity of Zα Domain from Carassius auratus PKZ Binding to Recombinant Plasmid Containing d(GC) or d(TA) Insert

作　　者：杨攀[1] 吴初新[1] 李琴[1] 夏玉洁[1] 胡成钰[1] 

机构地区：[1]南昌大学生命科学学院,南昌330031

出　　处：《中国生物化学与分子生物学报》2009年第4期383-387,共5页Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.30560116,30860218)~~

摘　　要：Zα是能够特异性识别并结合左旋DNA(Z-DNA)的蛋白结构域,首先在人ADAR1中鉴定,随后又在ZBP-1(DLM-1)和E3L等蛋白质中发现了该结构域.鲫鱼PKZ是首次报道的具有Zα结构域的鱼类eIF2α激酶.为深入了解鲫鱼PKZZα的功能,原核表达并亲和层析纯化了3种多肽,即野生型PZα(Zα1Zα2)、替换型P(Zα1)2(Zα1Zα1)和点突变型(PZαK34A、PZαS35A、PZαR39A、PZαP57A).同时,构建了含有d(GC)6、d(GC)13、d(TA)13特殊插入序列的3种重组质粒,用于体外模拟Z-DNA.凝胶阻滞实验分析了3种多肽分别与重组质粒的亲和性.结果表明,PZα和P(Zα1)2能够与d(GC)重组质粒结合,并且随着多肽含量的增加,阻滞效应越明显.与野生型PZα相比,替换型P(Zα1)2结合d(GC)重组质粒的能力更强.PZα和P(Zα1)2还能微弱地与d(TA)13重组质粒结合.点突变型多肽都不能与重组质粒结合,暗示鲫鱼PKZZα结构域中这4个氨基酸残基在结合核酸分子的过程中非常关键.该文结果有利于进一步揭示鱼类PKZZα结构域与Z-DNA结合的分子机理.

关 键 词：鲫鱼 PKZ Za d(GC) d(TA) 重组质粒 

分 类 号：Q959.468[生物学—动物学] S941[农业科学—水产养殖]