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作 者:商亮[1] 汪晖[1] 陈廖斌[2] Jacques Magdalou
机构地区:[1]武汉大学基础医学院药理学系,武汉430071 [2]武汉大学中南医院骨外科,武汉430071 [3]UMR7561 CNRS-UHP, Faculte de Medecine, Vandoeuvre-16s-Nancy Cedex, Lorraine, France
出 处:《中国药理通讯》2009年第2期52-52,共1页
摘 要:目的:证实阿魏酸钠(SF)治疗实验性骨关节炎(oA)软骨细胞的疗效,并应用蛋白组学技术初步探讨其分子机制。方法:取成年Wistar大鼠髋关节软骨细胞,行平面培养和藻酸钙串珠三维培养,分别设立正常对照组、IL-1β模型对照组、高浓度SF对照组和SF治疗组(1L-1β+低、中、高浓度SF)。SF处理细胞72h后,对平面培养细胞采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖,Realtime-PCR法检测软骨基质合成限速酶葡萄糖醛酸转移酶Ⅰ(GlcAT-Ⅰ)mRNA的表达以及碘化吡啶(PI)单染检测细胞凋亡率;对三维培养细胞采用放射性35S标记检测软骨蛋白多糖含量。为深入探讨其可能机制,还应用二维电泳法初步检测OA平面培养软骨细胞的蛋白组学变化,电泳后的凝胶经标准硝酸银染色法染色,BIO—RADGS-800TM扫描仪获取图像,PDQuest7.0软件分析蛋白图谱。结果:与正常对照组比较,模型对照组细胞MTT值、GlcAT-Ⅰ表达和蛋白多糖含量均明显降低,而细胞凋亡率明显增高(P〈0.01),而在SF对照组中,上述指标均无明显变化。125、500和1000μMSF均可显著升高MTT值,降低细胞凋亡率(P〈0.01),且具有浓度相关性。1000μMSF可使GlcAT-1的表达明显升高(P〈0.01),蛋白多糖却无显著变化。
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