麂角杜鹃ISSR-PCR反应体系的优化  

作　　者：赵芯[1] 金则新[1] 李建辉[1] 谈探[1] 

机构地区：[1]台州学院生态研究所,浙江临海317000

出　　处：《江苏农业科学》2009年第2期43-45,共3页Jiangsu Agricultural Sciences

基　　金：浙江省自然科学基金(编号:Y504220)

摘　　要：采用改进的SDS法提取麂角杜鹃基因组DNA,利用单因素试验测试模板DNA、Mg2+、dNTP、BSA、引物、Taq酶等条件因子对麂角杜鹃ISSR-PCR扩增结果的影响。试验表明,麂角杜鹃ISSR分析的最适PCR反应条件为,10μlPCR反应体积中含:1×Taq酶配套缓冲液(10 mmol/L Tris.HCl,pH值9.0,50 mmol/L KCl,0.1%Triton X-100),5ng模板DNA,1.0 mmol/L MgCl2,0.4 mmol/L4×dNTP,1 mg/ml BSA,5 pmol引物,0.25 UTaq酶。利用所建立的优化反应体系对浙江省大明山4个麂角杜鹃种群共84个个体进行遗传多样性分析,结果显示其总的多态位点百分率为88.07%,Nei指数为0.309 9,Shannon信息指数为0.464 0,表明麂角杜鹃种群遗传多样性处于较高水平。

关 键 词：麂角杜鹃 ISSR-PCR 反应体系 优化 

分 类 号：Q943[生物学—植物学]