适于长竹蛏的ISSR反应体系的优化  

Optimization of the ISSR Reaction System for Solen strictus

作　　者：陈燕妮[1] 孙振兴[1] 常林瑞[1] 徐建鹏[1] 祝伟 

机构地区：[1]鲁东大学生命科学学院,山东烟台264025 [2]蓬莱第四中学,山东烟台265602

出　　处：《安徽农业科学》2009年第10期4409-4410,4419,共3页Journal of Anhui Agricultural Sciences

基　　金：山东省高校实验技术项目(2005-396);鲁东大学研究生教育项目(YD05007)

摘　　要：[目的]以长竹蛏基因组DNA为模板,探讨利用简单重复序列区间分子标记技术进行PCR扩增的最优条件。[方法]采用单因素比较试验,分析了Mg2+、dNTP、TaqDNA聚合酶、引物以及模板DNA浓度对ISSR-PCR扩增效果的影响。[结果]长竹蛏的ISSR反应体系包括10×Buffer,2.5 mmol/LMg2+,0.25 mmol/L dNTP,0.5μmol/L ISSR引物,0.040 U/μlTaqDNA聚合酶,1.6 ng/μl模板DNA。[结论]优化后的反应体系适于长竹蛏的ISSR-PCR扩增。[Objective] The research on the optimal conditions for ISSR-PCR amplification using of genomic DNA of Solen strictus.[Method]With comparing experimentation,the effect of Mg2＋,dNTP,TaqDNA polymerase,ISSR primer and template DNA concentration on the ISSR-PCR amplification was analyzed.[Result] The reaction system was as followed： 10 × Buffer,2.5 mmol/L Mg2＋,0.25 mmol/L dNTP,0.5 μmol/L ISSR primer,0.040 U/μl TaqDNA polymerase,1.6 ng/μl DNA template.[Conclusion] Optimized the reaction system was applicable to Solen strictus ISSR-PCR amplification.

关 键 词：长竹蛏 ISSR PCR 

分 类 号：S188[农业科学—农业基础科学]