冰草ISSR-PCR反应体系的建立与优化  

Establishment and Optimization of ISSR Reaction System for Agropyron cristatum(L.) Gaertn.

作　　者：王方[1] 袁庆华[1,2] 

机构地区：[1]兰州大学草地农业科技学院,兰州730020 [2]中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京100193

出　　处：《草地学报》2009年第3期354-357,共4页Acta Agrestia Sinica

基　　金：国家科技支撑项目(2008BABD3B01);基本科研业务费专项(YWF-TD-3)

摘　　要：为进一步开展冰草属植物种质资源遗传多样性研究,寻找可用于冰草(Agropyron cristatum(L.)Gaertn.)的ISSR-PCR最适反应体系并建立与优化,具有重要的意义。通过优化影响ISSR-PCR体系的主要参数,最终确定在20μL体系中各反应物的最适含量为:40 ng模板DNA,0.2 mmol.L-1dNTP,0.5μmol.L-1ISSR引物,1 UTaq DNA聚合酶,2μL10×PCR Buffer,2.5 mmol.L-1MgCl2;引物815号的最适退火温度为50℃。该体系的建立为今后利用ISSR技术进行冰草属种质资源的遗传多样性分析奠定了技术基础。It is necessary to establish and optimize the of Agropyron cristatum （L.） Gaertn. Results show ISSR-PCR reaction system for genetic diversity study that the optimum concentration of seven reactants in 20 μL reaction mixture were as follows. 40 ng genomic DNA, 0.2 mmol· L^-1 dNTP, 0.5 μmol · L^- ISSR primer, 1 U Taq DNA polymerase, 2 μL 105〈 PCR buffer, 2.5 mmol · L^-1 MgCl2. The suitable annealing temperature of primer 815 was 50℃. This reaction system would provide the basis for the diversity analysis of A. cristatum with ISSR markers.

关 键 词：冰草 ISSR PCR反应体系 优化 

分 类 号：S812[农业科学—草业科学] Q943[农业科学—畜牧学]