氧化硫硫杆菌质粒pTt12复制原点片段分离及其重组质粒pSDT125转移性能  

IDENTIFICATION OF REPLICATION REGION OF THIOBACILLUS THIOOXIDANS PLASMID pTt12 ANDTRANSFER OF RECOMBINANT PLASMID pSDT125

作　　者：郑平[1] 颜望明[1] 

机构地区：[1]山东大学微生物技术国家重点实验室

出　　处：《山东大学学报（自然科学版）》1998年第2期228-235,共8页Journal of Shandong University(Natural Science Edition)

摘　　要：氧化硫硫杆菌重组质粒ｐＳＤＴ１２５在ＲＰ４质粒的带动下以高出ｐＢＲ３２５两个数量级的频率在大肠杆菌之间转移．转移后，ＲＰ４和ｐＳＤＴ１２５以分离的形式共存于接合转移子中．该质粒不能被ＳＭ１０菌株染色体上的ｔｒａ基因带动转移．以ｐＳＤＴ１２５质粒为基础，通过亚克隆构建了两个质粒ｐＳＤＴ１２５０，ｐＳＤＴ１２５１．二者可以被ＲＰ４质粒带动在大肠杆菌之间转移，转移频率与ｐＳＤＴ１２５相近，没有明显降低．还构建了含有氧化硫硫杆菌质粒ｐＴｔ１２片段的穿梭质粒ｐＳＤＭ２１１，可以被ＲＰ４带动在大肠杆菌与氧化硫硫杆菌之间转移．通过限制性内切酶分析，初步将ｐＴｔ１２的复制原点确定在３．０ｋｂ的片段内．おオ玊hiobacillus　thiooxidans　recombinant　plasmid　pSDT125　containing　pTt12　can　be　mobilized　between　E.coli　strains　by　plasmid　RP4　and　its　mobilization　frenquency　was　100　times　higher　than　that　of　pBR325.After　mobilization,RP4　and　pSDT125　coexist　in　the　conjugants　by　seperating　form.The　faliure　of　pSDT125　to　be　mobilized　by　tra　gene　located　on　the　chromosome　of　SM10　strain　showed　nonexistance　of　mob　gene　on　pTt12.Its　subclones,pSDT1250,pSDT1251,were　constructed　by　deletion　of　different　fragment　of　pTt12.Both　of　them　can　be　mobilized　by　RP4　between　Ecoli　strains　without　obvious　reduction　in　mobilization　frequency　in　contrast　to　pSDT125.A　shuttle　plasmid　pSDM211　with　a　fragment　of　Thiobacillus　thiooxidans　plasmid　pTt12　was　constructed.It　can　be　mobilized　between　E.coli　and　T.thiooxidans　by　RP4.The　origin　of　replication　of　pTt12　was　shown　to　be　contained　on　a　3.0kb　fragment　of　DNA　by　restruction　endonuclease　analysis.

关 键 词：氧化硫硫杆菌 带动转移 复制原点 穿梭质粒 

分 类 号：Q939.149[生物学—微生物学]