致弱过程中高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HuN4株部分生物学特性的研究  

Characterization of highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome virus HuN4 strain in the course of attenuation

作　　者：田志军[1,2] 安同庆[2] 周艳君[2,3] 彭金美[2] 陈谨[2] 王瑜[2] 童光志[2,3] 刘娣 

机构地区：[1]黑龙江省农业科学院,黑龙江哈尔滨150086 [2]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／猪病研究室,黑龙江哈尔滨150001 [3]中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241

出　　处：《中国预防兽医学报》2009年第6期424-426,共3页Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine

基　　金：黑龙江省政府博士后基金;国家973计划(2005CB523200);国家科技支撑计划(2006BAD06A04)

摘　　要：为了研制高致病性猪繁殖与呼吸综合征(HP-PRRS)弱毒疫苗,将高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)HuN4株进行了致弱驯化,在Marc-145细胞上对其进行了3次蚀斑克隆和连续传代。该毒株的病变速度随着代次增高逐渐加快,传至80代以后其病毒滴度达到最高并保持稳定;电镜观察发现低代次病毒粒子形态以棒状为主,高代次病毒粒子形态以球形为主;蚀斑形态比较发现低代次病毒形成的蚀斑大小不一,而高代次病毒形成的蚀斑大小均一;序列分析和病毒抗原性分析表明HuN4株传代过程中GP5蛋白羧基端1个主要抗原表位(196QWGRL200)发生突变即196Q突变为196R,针对该表位的单克隆抗体只与HuN4株低代次病毒反应而不与高代次病毒反应。以上结果表明:在Marc-145细胞上经蚀斑克隆和连续传代致使HP-PRRSVHuN4株部分生物学特性发生改变,这些特性的改变在病毒弱化过程中的作用还有待进一步的研究。To develop a attenuated vaccine against the highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome （HP- PRRS） virus, The HP-PRRS virus HuN4 strain was attenuated by serial passages and plaque cloned three times in Marc-145 cells. The virus titers reached the top from the eightieth passages. The virus was mainly in rod-like shape at lower passages and produced plaques of various sizes. However, at higher passages, the virus was mainly in sphere-like shape and produced uniform size plaques. Sequence analysis of the derivatives of HuN4 passages showed that a highly conservative epitope, ^196QWGRL200 was mutated to ^196RWGRL^200. As a result, a monoclonal antibody directly against the epitope could not recognize the higher passages of virus.

关 键 词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒 HuN4株 生物学特性 

分 类 号：S852.659[农业科学—基础兽医学]