鲍曼不动杆菌外膜蛋白CarO的原核表达、纯化和多克隆抗体的制备  

作　　者：马真[1] 蔡绍曦[1] 佟万成[1] 耿穗娜[1] 卢健聪[1] 赵海金[1] 

机构地区：[1]南方医科大学南方医院呼吸内科,广东广州510515

出　　处：《南方医科大学学报》2009年第6期1265-1267,共3页Journal of Southern Medical University

基　　金：广东省科技计划项目(2008A060202013);广州市科技局重点攻关项目(2006Z1-E0141)

摘　　要：目的表达和纯化带多聚组氨酸(6×His)标签的鲍曼不动杆菌杆菌外膜蛋白CarO(-binding protein)融合蛋白并制备抗CarO多克隆抗体,为研究临床鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药机制奠定基础。方法构建pET23d-CarO重组表达质粒,转入大肠埃希菌BL21(DE3),以IPTG诱导6×His-CarO融合蛋白表达,经镍离子金属螯合树脂纯化后,用纯化出的蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,Western印迹检测多克隆抗体的特异性。结果在大肠埃希菌中诱导出高水平表达的His-CarO融合蛋白,经亲和树脂纯化后免疫新西兰大白兔,获得了高特异性的抗CarO抗血清。结论成功构建pET23d-CarO原核表达质粒,表达并纯化出目标蛋白,制备出高特异性的多克隆抗体。

关 键 词：鲍曼不动杆菌 外膜蛋白 融合蛋白 多克隆抗体 

分 类 号：R392[医药卫生—免疫学]