深海古菌超嗜热α-淀粉酶易错PCR致突变的条件研究  被引量:2

Study on the Circumstances of Mutation of Hyperthermophilic α-Amylase from Deep-sea Archaeon through Error-prone PCR

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作  者:房耀维[1] 王淑军[1] 刘姝[1] 吕明生[1] 李玉静[1] 高爱伟 倪云霞[1] 滕晓栋 

机构地区:[1]淮海工学院海洋学院,江苏连云港222005

出  处:《淮海工学院学报(自然科学版)》2009年第2期86-89,共4页Journal of Huaihai Institute of Technology:Natural Sciences Edition

基  金:江苏省科技创新与成果转化(重大科技支撑与自主创新)专项引导资金项目(BE2008340);江苏省高校自然科学基础研究项目(08KJB550001);连云港市科技攻关项目(CG0714);淮海工学院博士启动基金资助项目(KQ07103)

摘  要:采用易错PCR技术在深海古菌菌株Thermococcus siculiHJ21超嗜热α-淀粉酶基因中引入突变,研究了Mg2+浓度、Mn2+浓度、dCTP和dTTP浓度等条件对突变率的影响。结果表明,在Mg2+浓度为5.0 mmol/L,Mn2+浓度为0.4 mmol/L,dTTP和dCTP浓度为1.5 mmol/L的条件下,碱基突变率为3.2%。Error-prone PCR method is used to create the mutation of deep-sea archaeon Therrno- coccus siculi HJ21 α-amylase. The effects of different elements on the mutation rate is studied, including Mg^2+ , Mn^2+ , dCTP and dTTP of different concentration levels. Results show that the mutation rate is 3.2% under the circumstances of 5.0 mmol/L Mg^2+ , 0.4 mmol/L Mn^2+ , 1.5 mmol/L dTTP and 1.5 mmol/L dCTP.

关 键 词:易错PCR 条件 突变率 

分 类 号:Q936[生物学—微生物学]

 

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