重组马白细胞介素-18生物学活性的测定及单克隆抗体中和活性鉴定  

Biological Activity Determination of Recombinant Equine Interleukin-18 and Identification of Neutralized Activity of Monoclonal Antibodies

作　　者：童铁钢[1] 白宇[1] 王群[1] 张维军[1] 刘光亮[1] 徐树兰[1] 林燕[1] 孙庆歌[1] 杨涛[1] 吴东来[1] 

机构地区：[1]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,农业部兽医公共卫生重点开放实验室,兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨150001

出　　处：《农业生物技术学报》2009年第3期370-374,共5页Journal of Agricultural Biotechnology

基　　金：国家高技术研究与发展计划(863)项目(No.2006AA10A203);黑龙江省自然科学基金重点项目(No.ZJN-0602-01)

摘　　要：应用实时荧光定量RT-PCR方法评价了大肠杆菌表达的重组马白细胞介素-18(rEIL-18)刺激马外周血单核细胞(PBMCs)产生马IFN-γ(EIFN-γ)的活性。在重组人IL-12(rhIL-12)的协同作用下,rEIL-18在体外刺激马PBMCs产生EIFN-γ的效应是阴性对照的20倍,并且在一定rhIL-12浓度的条件下,rEIL-18在体外诱导马PBMCs产生EIFN-γ的能力呈一定的剂量依赖性。此外,评价了制备的9株抗rEIL-18单克隆抗体中和rEIL-18的生物学活性的能力,证实其中1株可中和rEIL-18的生物学活性,并且呈一定的剂量依赖性。To examine the bioactivity of recombinant equine interleukin-18 （rEIL-18） obtained from Escherichia coli, rEIL-18 was evaluated to see if it showed a synergistic effect with recombinant human interleukin-12 （rhIL-12） for the induction of equine interferon-γ （EIFN-γ） gene expression from equine peripheral blood mononuclear cells （PBMCs） by Real-time RT-PCR. REIL-18 could induce EIFN-γ mRNA expression from equine PBMCs about 20-fold higher than that of negative control in the presence of rhIL-12.And the effect to induce EIFN-y gene expression was dose-dependent with rEIL-18 in a fixed concentration of rhlL-12. Nine anti-rEIL-18 monoclonal antibodies （mAbs） were also evaluated if they could neutralize the bioactivity of rEIL-18. And one of the 9 mAbs could neutralize rEIL- 18 bioactivity and its effect was dose-dependent.

关 键 词：马白细胞介素-18 生物学活性 单克隆抗体 

分 类 号：S188[农业科学—农业基础科学] S185