藻红蓝蛋白α亚基突变体的构建及体外重组  

Construction of Mutants of Phycoerythrocyanin α Subunit and the Study of in vitro Reconstitution

作　　者：朱菁萍[1] 邓黎黎[1] 苏紫君[1] 赵开弘[1] 

机构地区：[1]华中科技大学环境科学与工程学院,武汉430074

出　　处：《武汉理工大学学报》2009年第13期45-48,共4页Journal of Wuhan University of Technology

基　　金：国家自然科学基金(20807016)

摘　　要：为获得分子量较小的、具有光化学活性的藻胆蛋白,通过分子设计和基因工程手段得到藻红蓝蛋白α亚基(α-PEC)脱辅基蛋白N端缺失突变体PecA(N-44)和PecA(N-64)。将突变体分别与藻蓝胆素PCB进行体外直接重组和裂合异构酶PecE/PecF催化下的重组实验,通过测定重组产物的吸收光谱确定其光化学活性。结果表明,PecA(N-44)与PCB在酶催化下偶联生成的PVB-PecA(N-44)(=α-PEC(N-44))分子量为13.4 kDa,具有与α-PEC相似的可逆光致变色性质,光化学活性为78%。To obtain smaller phycobiliproteins with photochemical activity, two N-truncated mutants of phycoerythrocyanin α subunit, PecA（N-44） and PecA（N-64） were constructed. PecA（N-44） and PecA（N-64） were reconstituted with phycocyanobilin in vitro respectively, with or without the catalysis of lyase-isomerase PecE/PecF. The reconstituted products were analyzed by absorption spectrum. The results showed that, the enzymatic reconstituted product of PecA（N-44） is PVB-PecA （N-44） （ = α-PEC（N-44） ）, which has a molecular weight of only 13.4 kDa and reversible photochemical activity of 78 %.

关 键 词：藻红蓝蛋白 突变体 光化学活性 体外重组 

分 类 号：Q784[生物学—分子生物学]