小鼠FcγRⅢ原核表达、纯化及鉴定  

作　　者：张利娜[1,2] 张改平[2] 席俊[2] 苗现伟[2] 王丽[2] 乔松林[2] 

机构地区：[1]中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京100193 [2]河南省农业科学院,农业部动物免疫学重点开放实验室,河南省动物免疫学重点实验室,河南郑州450002

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2009年第8期692-694,共3页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：国家自然科学基金重点项目(30730068);国家重点基础研究发展计划(973)资助项目(2005CB523200)

摘　　要：目的:制备纯化重组蛋白mFcγRⅢ,并鉴定其生物学活性。方法:从克隆载体mRⅢ-T中扩增mFcγRⅢ胞外区,构建原核表达载体pETmRⅢ,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导重组蛋白表达,SDS-PAGE和Westernblot对重组表达蛋白进行鉴定;表达产物通过包涵体纯化后用稀释方法复性;ELISA检测复性蛋白活性。结果:成功构建了重组表达质粒pETmRⅢ,纯化和复性了重组蛋白mFcγRⅢ;复性的重组蛋白mFcγRⅢ具有较强的体外活性。结论:原核重组蛋白mFcγRⅢ复性后具有较强的体外结合配体特性,为探索重组蛋白治疗自身免疫病奠定了基础。

关 键 词：FcγRⅢ重组蛋白 原核表达 包涵体 复性 

分 类 号：R392.11[医药卫生—免疫学]