人类核糖核酸酶9基因的克隆及表达载体的构建  

作　　者：程桂芝[1] 李芳[1] 

机构地区：[1]大连医科大学免疫学教研室,辽宁大连116044

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2009年第8期748-750,共3页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

摘　　要：目的:构建人类核糖核酸酶9(human ribonuc lease9,hRNase9)的重组表达载体。方法:从成年人附睾组织提取了总RNA,通过RT-PCR扩增了hRNase9编码成熟肽的基因片段,将其克隆入载体pET25b(+)的NdeI和EcoRI位点之间,构建了重组表达载体pET25b(+)-hRNase9,并通过PCR法、限制性内切酶消化法和DNA序列测定加以证实,以IPTG诱导重组载体转化宿主菌E.coliBL21(DE3)表达重组hRNase9蛋白。结果:重组载体pET25b(+)-hRNase9构建成功,SDS-PAGE显示重组载体转化宿主菌E.coliBL21(DE3)表达了Mr约为21000的重组hRNase9蛋白。结论:成功的扩增了hRNase9编码成熟肽的基因片段,构建了重组表达载体pET25b(+)-hRNase9,为下一步研究奠定了基础。

关 键 词：人类核糖核酸酶9 基因克隆 重组表达载体 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学]