篦子三尖杉ISSR-PCR体系优化  

Establishment of Cephalotaxus Oliveri ISSR-PCR Optimal Conditions

作　　者：应站明[1] 杨明照[2] 苏应娟[2] 

机构地区：[1]萍乡高等专科学校,江西萍乡337000 [2]中山大学生命科学学院,广东广州510275

出　　处：《南昌大学学报（理科版）》2009年第3期298-301,共4页Journal of Nanchang University(Natural Science)

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30771763);校级课题资助(08PXKY-26)

摘　　要：采用正交设计法研究适合篦子三尖杉(Cephalotaxus oliveri)的ISSR-PCR反应体系,对影响ISSR-PCR的模板、引物、Mg2+、dNTP、Taq酶等5个因素进行了优化。确定了篦子三尖杉ISSR-PCR扩增的最佳体系,即20μl的反应体系中包括:1μl 10×PCRbuffer、2.5 mmol/LMg2+、0.2 mmol/L dNTPs、0.25mol/L的ISSR引物、1.5UTaqDNA聚合酶、50 ng模板DNA。运用优化的体系对江西武功山篦子三尖杉总DNA进行ISSR-PCR扩增,获得较好效果。The orthogonal design was used to optimize ISSR - PCR amplification system, such as DNA template, primers, concentration of Mg^2＋ , dNTPs and Taq DNA polymerase were investigated to optimized the ISSR -PCR reaction system of Cephalotaxus oliveri. A sutable ISSR - PCR reaction system was established, namely 20 lreaction system contaning： 1 μl 10 × PCRbuffer 2.5mmol/LMg^2＋ , 0.2 mmol/L dNTPs, 0.25 μmol/L Primer, 1.5U TaqDNA polymerase, 50ngDNA. The optimized system laid the groundwork for ISSR molecular analysis of of Cephalotaxus oliveri.

关 键 词：篦子三尖杉 ISSR 正交设计 PCR 

分 类 号：Q948[生物学—植物学]