VEGF通过MAPK途径上调MC3T3-E1及C2C12细胞中Cbfa1基因的表达  

Core binding factor al （Cbfal） up-regulated by VEGF through mitogen-activated protein kinase （MAPK） pathway in MC3T3-E1 and C2C12 cells

作　　者：裴育[1,2] 夏维波[1] 邢小平[1] 周学瀛[1] 孟迅吾[1] 

机构地区：[1]中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院内分泌科卫生部内分泌重点实验室,北京100730 [2]中国人民解放军总医院老年内分泌科,北京100853

出　　处：《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》2009年第2期120-126,共7页Chinese Journal Of Osteoporosis And Bone Mineral Research

基　　金：首都医学发展科研基金资助项目（Capital ZD199908）

摘　　要：目的研究生长因子VEGF对Cbfa1的调节作用及其与MAPK信号传导通路的关系。方法采用瞬时转染技术和RT-PCR方法。结果在MC3T3．E1细胞中，VEGF（1×10^-8～1×10^-6g·L^-1）作用24小时能够增加Cbfa1基因启动子活性，相对荧光素酶活性分别为对照组的1．29（P〈0．05），1．28（P〈0．01）和1．40（P〈0．05）。而加入PD98059（10μmol/L）后不但抑制了Cbfa1基因启动子活性的基础表达，而且完全阻断了VEGF所诱导的Cbfa1基因启动子活性的增加（P〈0．05）。C2C12细胞中不同浓度的VEGF处理组，其相对荧光素酶活性与对照组相比未见显著性差异。MC3T3-E1细胞中，VEGF处理前后，MC3T3-E1细胞中Cbfa1基因mRNA的表达水平未见显著变化。C2C12细胞中，VEGF处理后，第2天和第3天Cbfa1基因mRNA的表达由处理前的32．63±4．41，分别增加至46．56±2．70（P〈0．01）和50．35±5．62（P〈0．05）。PD98059阻断了C2C12细胞中VEGF对Cbfa1基因mRNA表达的上调作用。结论VEGF部分通过MAPK信号传导通路增加MC3T3-E1和C2C12细胞中小鼠Cbfa1基因启动子活性及mRNA的表达。Objective To study the involvement of the MAPK pathway in Cbfal stimulated by VEGF. Methotis The methods of transient transfeetion and RT-PCR were used. Results MC3T3-E1 cells, VEGF （ 1 ×10^-8～1×10^-6g·L^-1） enhanced the luciferase activity about 1.29 （ P 〈 0. 05 ）, 1.28 （ P 〈 0. 01 ） and 1.40 （ P 〈 0. 05 ） folds respectively compared with that of control group. C2C12 cells, VEGF had no effect on the luciferase activity of p696-Luc. PD98059 （10μmol/L）, a specific inhibitor of MAPK, suppressed basal and completely blocked VEGF-induced expression of Cbfal promoter activity in MC3T3-E1 cells （ P 〈 0. 05 ）. VEGF had no effect on Cbfal mRNA level in MC3T3-E1 cells. Treatment of VEGF resulted in increases in Cbfal gene expression at d2 and d3 （dO： 32.63 ±4.41 vs d2：46.56 ±2. 70, P 〈0. 01 ; d3： 50. 35 ±5.62, P 〈0. 05 in C2C12 cells. PD98059 blocked VEGF-induced Cbfal gene expression in C2C12 cells. Conclusion VEGF could increase the promoter activity in MC3T3-E1 ceils and the expression of murine Cbfal gene in C2C12 cells. And the MAPK pathway is required for VEGF responsiveness.

关 键 词：核心结合因子A1 血管内皮细胞生长因子 有丝分裂原激活蛋白激酶 MC3T3-E1细胞 C2C12细胞 

分 类 号：R329.28[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]